Après la synthèse chimique des peptides par FMOC en phase solide, il existe de nombreuses méthodes de clivage et deux types de base sont maintenant introduits que nous utilisons couramment.
1. Méthode acide forte (TFA)
La résine sèche a été placée dans un ballon à shake et une quantité appropriée de charognards contenant a été ajoutée. (Charognards) réactif de coupe d'acide trifluoroacétique (TFA), résine 10-25 ml / g, plafonné et secoué par intermittence à température ambiante avec rotation. La résine a été drainée, lavée 2-3 fois avec un nouveau TFA, le filtrat a été combiné et 8 à 10 fois le volume d'éther de diéthyle de glace a été abandonné. Parfois, certains TFA peuvent être cuits à la vapeur pour obtenir des précipités de peptides bruts. L'éther peut être utilisé pour augmenter l'efficacité des précipitations par refroidissement assisté par la glace. Enfin, le produit peptidique brut précipité a été collecté.
Résine appropriée: résine Wang ou Rink Amide Resin
2, Méthode d'acide faible (TFA ou dilution acide acétique) 1% TFA:
1 g de peptides contenant de la résine a été ajouté à un flacon de shake en verre de solution de dichlorométhane contenant 1% de TFA, scellé et tremblé pendant 2 min. Le filtrat a été pressé avec de l'azote dans un autre nouveau ballon de shake de méthanol contenant 10% de pyridine, et la procédure a été répétée 10 fois. Les peptides protecteurs restant sur la résine ont été lavés trois fois en utilisant 30 ml de DCM et 30 ml de MeOH. Les résidus ont été vérifiés et nettoyés par TLC ou HPLC. Tous les filtrats ont été combinés et 5% du solvant a été cuit sous pression réduite. Quarante ml d'eau ont été ajoutés et les précipitations ont aidé au mélange de refroidissement. Après filtration, le produit a été lavé trois fois avec de l'eau propre, placé dans un four à séchage sous vide et séché avec KOH ou P2O5.
Diluer l'acide acétique:
Les peptides suspendus à la résine ont été traités avec une solution de coupe pendant 2 h en utilisant ACOH // TFE / DCM (2: 2: 6), la résine a été filtrée et la résine a été lavée trois fois avec une solution de coupe. L'excès d'acide acétique a été retiré en ajoutant 15 fois le N-hexane au filtrat mixte et à la trempage rotatif.
Résine d'application: résine 2-CTC
Heure du poste: 2025-07-01