1. Quelles impuretés y a-t-il dans les non-HPLC purifiés?
R: peptide modifié et impuretés peptidiques non modifiées dans le peptide modifié brut et désaltéré: tels que le peptide modifié de longueur non de longueur et certaines matières premières telles que le DTT, le TFA, etc.
2. Quelles impuretés sont purifiées par HPLC?
R: Le peptide modifié purifié par HPLC aura encore beaucoup d'impuretés, et les impuretés sont généralement des peptides courts et un peu de TFA.
3. Combien de temps convient-il?
R: La synthèse du peptide modifié doit tenir compte de la longueur du peptide modifié, de la charge, de l'hydrophilicité et de l'hydrophobicité et d'autres facteurs. Plus la longueur totale est longue, plus la pureté et le rendement du produit brut sont faibles, et plus la difficulté de purification est élevée et la probabilité de difficulté de synthèse. Cependant, il n'y a aucun moyen de modifier la séquence du domaine fonctionnel du peptide modifié, mais afin de terminer la synthèse du peptide modifié, parfois seuls certains acides aminés auxiliaires peuvent être ajoutés dans le domaine en amont et en aval du domaine fonctionnel pour améliorer la solibilité et l'hydrophobicité du peptide modifié. Si le peptide modifié est trop court, il peut y avoir des problèmes dans la synthèse. Le premier problème est que le peptide modifié synthétisé a certaines difficultés dans le processus de post-traitement. Le peptide modifié dans 5 peptides a généralement des acides aminés hydrophobes, sinon le post-traitement est difficile. Des peptides modifiés en dessous de 15 résidus d'acides aminés peuvent généralement être obtenus avec un rendement et un rendement satisfaisants.
Quelques questions et réponses sur la solubilité des peptides modifiés
4. Comment juger la solubilité du peptide modifié de la séquence?
(1) Le peptide modifié contenant une proportion élevée d'acides aminés hydrophobes tels que Leu, Val, IIE, Met, Phe et Trp n'est pas facilement soluble en solution aqueuse ou presque insoluble. Cet acide aminé peut être problématique en purification ou en synthèse.
(2) the proportion of hydrophobic amino acids under normal conditions < The proportion of charged amino acids can reach up to 20%. If the N or C of the modified peptide is short, the increase of polar amino acids can also improve the solubility.
5. Pourquoi est-il difficile de synthétiser Cys, Met ou Trp?
R: Les peptides modifiés contenant des Cys, Met ou TRP ne peuvent pas être synthétisés, et les produits de haute pureté sont difficiles à obtenir. Cela est principalement dû au fait que ces groupes sont moins stables et sujets à l'oxydation. L'utilisation et le stockage de ces peptides modifiés nécessitent des soins spéciaux pour empêcher l'ouverture répétée du couvercle.
6, pourquoi un rendement ou une pureté synthétique sera très faible?
R: Il existe une différence considérable entre la synthèse de peptides modifiés et la synthèse des amorces. Il y a très peu d'amorces qui ne peuvent pas être synthétisées, mais il existe souvent des peptides modifiés qui ne peuvent pas être synthétisés. Tels que Val, Ile, Tyr et TRP, Leu, Phe, Gln et THR Omino Acid près ou Loop, les peptides modifiés ne peuvent pas s'étirer dissous dans le processus de synthèse, l'efficacité synthétique est plus faible. L'efficacité de la synthèse et la pureté du produit sont très faibles dans les cas suivants, tels que: répéter pro, seron, répéter ASP, quatre gly consécutifs, etc.
7. Comment est-il purifié?
R: Les peptides modifiés sont généralement purifiés par colonne en phase inversée (comme C8, C18, etc.) à 214 nm. Le système tampon est généralement une solution contenant du TFA, Ph2.0. Buffera contenait 0,1% de TFAINDDH2O et BufferB contenait 1% de TFA / ACN / PH2.0. Il a été dissous dans Buffera avant la purification; Si la solution n'est pas satisfaisante, dissoudre avec le tampon, puis diluer avec Buffera; Pour les peptides modifiés hautement hydrophobes, parfois un peu d'acide formicacide ou acétique est ajouté.
Heure du poste: 2025-07-01