La résistance chimique des peptides dépend de la composition et de la séquence des acides aminés. Les peptides lyophilisés sont généralement plus durables que leurs homologues en solution. Les méthodes de dégradation potentielles des peptides sont les suivantes:
1, hydrolyse: Ceci est généralement inclus dans l'ASP dans la séquence (D) pour le problème dans le peptide, il est très facilement déshydraté de former un anneau intermédiaire. Par exemple, il y a ASP dans la séquence. -Pro (DP) Dans ce cas, l'intermédiaire imide en forme d'anneau produit par la catalyse acide conduirait au clivage de la chaîne peptidique. De même, l'ASP-Gly (DG) est présente dans la séquence et dans ce cas, l'intermédiaire circulaire peut être hydrolysé dans le mode ASP d'origine d'origine isoasqueuse (inoffensive) ou un analogue potentiellement inactif. Enfin, tous les modèles d'acide aspartique pourraient être complètement convertis en analogues d'acide isoasqueux. "À un niveau plus petit, il contient des Ser (S), une séquence qui forme également un intermédiaire imide circulaire qui nettoie finalement la chaîne peptidique."
2, désamidation: cette réaction catalysée par la base se produit souvent en présence de ASN-Gly (NG) ou GLN-Gly (QG) dans la séquence et suit un mécanisme de séquence ASP-Gly (DG) similaire. La désamination (perte d'amine) dans la séquence ASN-Gly donne un intermédiaire imide cyclique, qui est ensuite hydrolysé pour produire des analogues Asn aspartic ou des analogues d'acide isoastipique. De plus, l'intermédiaire de l'image annulaire peut provoquer une dérotation D-ASP ou externe à Asnd-Iso - quelque chose de similaire à ASP, qui peuvent tous être inactifs.
3, oxydation: les résidus Cys et Met sont les principaux résidus qui subissent une oxydation réversible. L'oxydation de la cystéine est accélérée à des valeurs de pH plus élevées, où le thiol élimine plus facilement la protonation et est sujet à générer des liaisons disulfure dans ou entre les chaînes. La liaison disulfure peut être facilement inversée par traitement avec du chlorhydrate de chlorhydrate (Tris) ou de Tris (2-carboxyléthylphosphine). La méthionine est oxydée par chimique et photochimie pour produire du dioxyde de méthionine, qui pénètre en outre dioxyde de méthionine, qui sont tous deux difficiles à inverser.
4, Diketopiperazine and pyroglutamic acid production: formation of dimethylpiperazine usually occurs when Gly is in the third position of the N terminus, especially if Pro or Gly is in position 1 or 2. This reaction involves nucleophilic attack of the N-terminal nitrogen on the amide benzyl group between the second and third amino acids, resulting in cleavage of the first two amino acids of the Méthode de la dikétopiperazine. D'un autre côté, si GLN est situé à l'extrémité N-terminale, la formation d'acide pyroglutamique est presque inévitable. Il s'agit d'une réaction similaire dans laquelle l'azote N-terminal attaque le carbone de base de la chaîne latérale de GLN pour former la désamination d'un analogue peptidique pyroglutamylique. Cette conversion se produit également avec les analogues du peptide pyroglutamate contenant du N-terminal.
5. Racémisation: Ce terme est largement utilisé pour désigner la perte globale de l'intégrité chirale d'un acide aminé ou d'un peptide. La racémisation implique la conversion d'un acide aminé d'un énantiomère catalysé par la base, généralement une forme L, en type 1 des énantiomères de forme L et D. : 1. Mélange. Ceci est plus important pendant la génération des peptides, mais moins problématique dans le peptide fini. De plus, le commutateur est difficile à détecter et ne peut pas être contrôlé.
Une approche générale pour éviter ou minimiser la dégradation du peptide consiste à dégrader le peptide à - 20 ° C ou mieux - 80 ° C pour le stockage lyophilisé, si disponible. Si le peptide est en solution aqueuse, chaque échantillon d'aliquote doit être congelé pour éviter la congélation et la décongélation. L'exposition au pH> doit être évitée; Moyen 8. Cependant, si un pH & gt est nécessaire; Si le peptide fond à 8, son exposition doit être minime.
Heure du poste: 2025-07-01