Aperçu de l'expression des protéines

La protéinexpression fait référence à la technologie de reproduction du gène cible dans un vecteur artificiel, puis de l'introduire dans la cellule receveuse ou le système sans cellule pour exprimer la protéine dans le système hétérologue.

L'expression des protéines peut résoudre le problème que les protéines natives sont difficiles à obtenir. Depuis le premier établissement de l'expression des protéines hétérologues dans les années 1970, des milliers de protéines recombinantes ont été exprimées avec succès, ce qui favorise efficacement le développement continu de la biotechnologie et de la recherche et de l'industrie biomédicales.

Objectif:

Grâce à l'expression des protéines, il est d'abord possible d'obtenir des protéines difficiles à obtenir à partir de sources naturelles.

Deuxièmement, le grand lot et la haute pureté des produits d'expression des protéines facilitent non seulement l'analyse de la protéine cible, mais réduisent également considérablement le coût.

Plus important encore, les protéines recombinantes sont généralement sélectionnées pour indiquer une biosécurité élevée de la cellule hôte, évitant ainsi certains risques de biosécurité potentiels de l'hôte pathogène.

Méthode:

Il comprend principalement les processus de réplication des fragments de gènes, l'introduction dans le système d'expression, l'expression induite, la purification des produits et l'analyse.

Aperçu de l'expression des protéines

Classification:

Les systèmes d'expression des protéines peuvent généralement être divisés en:

1. Système d'expression nucléaire: Escherichia coli est le système d'expression des protéines le plus courant, qui présente les avantages de fond génétique clair, de reproduction pratique, de faible coût et d'expression élevée. Cependant, il manque de mécanisme de modification de la traduction et ne convient pas à la glycosylation ou au clivage spécial de point de sélection pour modifier l'expression des protéines. Bacillus subtilis peut également être utilisé pour l'expression des protéines, et ses avantages sont une forte capacité d'expression métabolique et une faible activité de protéase, ce qui a progressivement attiré l'attention.

2. Système d'expression eucaryote: Un certain degré de glycosylation peut être obtenu après la traduction, ce qui est plus proche de l'activité naturelle des protéines eucaryotes. Il est principalement inclus. ① Système d'expression de levure (levure rouge commune, levure de brassage, etc.), la levure peut être moelleuse à haute densité, peut être modifiée après la traduction, présente les avantages des cellules hôtes procaryotes et eucaryotes et est également un bon système d'expression des protéines. ② Système d'expression des cellules d'insectes: les gènes exogènes sont transfectés dans les cellules d'insecte par un vecteur de baculovirus pour l'expression. Il s'agit d'un système d'expression élevé pour les protéines eucaryotes, qui convient aux protéines membranaires, aux protéines macromoléculaires, aux protéines kinases et à d'autres protéines difficiles à exprimer dans le système procaryote. ③ Système d'expression des cellules de mammifères: l'efficacité de traduction et de décoration des cellules de mammifères est beaucoup plus élevée que celle des systèmes de levure et d'insectes. La structure et la fonction des cellules de mammifères sont plus proches des protéines eucaryotes natives, mais le niveau d'expression est faible et le coût est élevé.

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