La modification de la phosphorylation joue un rôle crucial dans la vie des cellules et affecte plusieurs aspects. La phosphorylation des protéines est étroitement liée à divers processus biologiques, tels que la réparation des dommages à l'ADN, la régulation transcriptionnelle, la transduction du signal et la régulation de l'apoptose cellulaire. L'étude des protéines et des peptides phosphorylés aide à révéler les mécanismes de ces processus et à approfondir notre compréhension de l'essence des activités de vie. La biotechnologie du peptide Hong possède une technologie de marquage peptidique de phosphorylation mature. Tirant parti de ses propres avantages technologiques et de matières premières, nous pouvons synthétiser les peptides contenant de la sérine phosphorylée (PSER), de la thréonine phosphorylée (PTHR) et de la tyrosine phosphorylée (PTYR) et fournissent des peptides de haute qualité avec des sites de phosphorylation à cinq à cinq.
Aperçu de la technologie de marquage de phosphorylation:
Les peptides phosphorylés se réfèrent principalement aux groupes hydroxyle de la chaîne latérale des résidus de sérine (SER), de tyrosine (Tyr) et de thréonine (THR) dans la chaîne peptidique modifiée en esters de phosphate acide. Les peptides phosphorylés jouent un rôle crucial dans l'étude de la phosphorylation des protéines. Par conséquent, il est particulièrement important d'explorer profondément les réactions de phosphorylation des protéines et des peptides et de trouver des méthodes synthétiques matures et simples.
À l'heure actuelle, les méthodes de modification de la phosphorylation des peptides se répartissent principalement en deux catégories:
(1) Incorporez directement les acides aminés phosphorylés protégés de manière appropriée dans la séquence peptidique:
Premièrement, les acides aminés qui doivent être phosphorylés (tels que Thr, Ser ou Tyr) sont soumis à un traitement de phosphorylation et protégés de manière appropriée. Ensuite, après le processus de synthèse des peptides à phase solide conventionnelle (SPPS), les monomères phosphorylés sont liés aux sites spécifiques du polypeptide. Cette méthode est simple à utiliser et est devenue l'une des principales techniques de modification de la phosphorylation ponctuelle des peptides.
(2) Après avoir synthétisé la séquence polypeptidique sur la résine, les groupes hydroxyle de la chaîne latérale de Ser, Tyr ou Thr sont phosphorylés:
Lors de la modification de la phosphorylation, si la méthode de condensation directe des monomères phosphorylées dans le polypeptide est adoptée, l'acide aminé phosphorylé, en raison de sa plus grande chaîne latérale, entraîne une augmentation de l'obstacle stérique, ce qui rend la condensation avec la chaîne peptidique difficile. De plus, l'introduction d'acides aminés ultérieurs deviendra également relativement complexe, en particulier lorsqu'il existe plusieurs sites de phosphorylation. Le processus de synthèse sera extrêmement difficile, et le produit final sera très complexe, ce qui rend la séparation difficile et le rendement extrêmement faible. Par conséquent, lorsqu'il y a plusieurs sites nécessitant une phosphorylation dans la chaîne polypeptidique, il peut être considéré pour compléter la synthèse de la séquence polypeptidique sur la résine d'abord, puis phosphoryler les groupes hydroxyle de la chaîne latérale de Ser, Tyr ou Thr. Au cours de ce processus, retirez d'abord sélectivement la chaîne latérale des groupes de protection de l'acide aminé à marquer. Pour Tyr et THR, les acides aminés non protégés de leurs chaînes latérales peuvent être directement réagi. Les groupes de protection de la chaîne latérale peuvent être retirés quantitativement dans la condition de 1% de TFA / DCM. Dans cette méthode, l'intermédiaire actif de la bis-benzyl phosphoraminate et du tétrazole peut être généré par la réaction avec ce dernier, et il peut être lié au groupe hydroxyle. Ensuite, une réaction d'oxydation dans des conditions d'acide du peroxyde peut être effectuée pour générer le groupe phosphonyle, terminant la phosphorylation.
Heure du poste: 2025-07-16