Le tripeptide réactif Limulus est une substance tripeptidique avec une séquence spécifique extraite du lysat de cellules sanguines de limule ou synthétisée artificiellement. Le tripeptide réactif Limulus est un substrat chromogénique utilisé pour l'analyse quantitative (telle que le test d'endotoxine bactérienne) pour détecter et mesurer les composants des bactéries à Gram négatif.—endotoxines. Lorsqu'il est activé par des enzymes activées par les endotoxines, un composé coloré (tel que la p-nitroaniline) est libéré, permettant de mesurer l'intensité de la couleur et de la corréler avec la teneur en endotoxines.
Principe de fonctionnement
Activation des endotoxines : En présence d'endotoxines, les amebocytes présents dans le sang du limule libèrent des enzymes, déclenchant ainsi la cascade de coagulation.
Action enzymatique : L'enzyme activée (généralement une enzyme de coagulation) agit alors sur un substrat chromogène.
Réaction chromogénique : L'enzyme clive le substrat, libérant un composé jaune appelé p-nitroaniline (pNA).
Analyse quantitative : L'intensité de la couleur jaune est proportionnelle à la teneur en endotoxines de l'échantillon et est généralement mesurée à l'aide d'un spectrophotomètre à une absorbance de 405 nm.
Méthodes de préparation
Le tripeptide réactif Limulus peut être obtenu par deux approches en termes de préparation.
1. Extraire les composants naturels des cellules sanguines de Limulus et obtenir le tripeptide actif par séparation et purification.
2. Utiliser la technologie de synthèse en phase solide pour connecter séquentiellement des séquences d'acides aminés spécifiques, contrôlant avec précision la structure du tripeptide.
En raison des politiques de conservation du Limulus (avec des provinces telles que le Zhejiang, le Fujian, le Guangdong et le Guangxi le classant comme « une faune aquatique protégée clé provinciale » / Hong Kong a publié des règlements à la fin de 2012 interdisant le chalutage de fond), et parce que le processus d'extraction est complexe et difficile, le coût de la première méthode est relativement élevé. C’est pourquoi la synthèse en phase solide est désormais couramment utilisée. En connectant séquentiellement des séquences d’acides aminés spécifiques, la structure du tripeptide peut être contrôlée avec précision. Cette méthode garantit non seulement la stabilité et la cohérence du produit, mais permet également une production à grande échelle, répondant aux besoins de l’industrie pharmaceutique en matière de tests de réactifs.
Heure de publication : 2025-11-04