Les antigènes protéiques recombinants ont souvent plusieurs épitopes différents, dont certains sont des épitopes de séquence et d'autres sont des épitopes structuraux.Les anticorps polyclonaux obtenus en immunisant des animaux avec des antigènes dénaturés sont des mélanges d'anticorps spécifiques d'épitopes individuels et peuvent être utilisés en général pour détecter des structures naturelles ou des protéines cibles dénaturées.Un avantage secondaire de l’utilisation de protéines dénaturées comme immunogènes est que les protéines dénaturées ont tendance à être plus immunogènes et peuvent stimuler une forte réponse immunitaire chez les animaux.
Le système d'expression d'Escherichia coli est généralement choisi à des fins antigéniques car c'est le système le plus coûteux en termes de temps et d'argent.Afin d'améliorer les possibilités d'expression de la protéine cible et la commodité de la purification, parfois seul un petit fragment de la protéine cible, tel qu'un domaine spécifique, est exprimé.
La structure tridimensionnelle des protéines
Le domaine spécifique d'une protéine
Si le but de la préparation d'anticorps est uniquement pour la détection du wb, il est économique et rapide d'utiliser un petit peptide synthétique comme antigène, mais il existe un risque d'immunogénicité faible ou de non-régénicité en raison d'une sélection inappropriée du segment peptidique.Étant donné que la préparation des anticorps nécessite une longue période, deux ou trois segments peptidiques différents sont souvent sélectionnés pour préparer des anticorps à l'aide d'un antigène polypeptidique afin de garantir le taux de réussite de l'expérience.
La pureté de l'antigène polypeptidique pour l'immunisation doit être supérieure à 80 %.Bien qu’une pureté plus élevée permette théoriquement d’obtenir des anticorps avec une meilleure spécificité, en pratique, les animaux produisent toujours un grand nombre d’anticorps non spécifiques, masquant ainsi les avantages de la pureté des antigènes.
De plus, la préparation d'anticorps à partir de petits peptides doit être réticulée à l'antigène porteur approprié pour améliorer son immunogénicité.Deux porteurs antigéniques courants sont le KLH et la BSA.
Heure de publication : 23 mars 2023