Dans la recherche biologique, les polypeptides avec une longue séquence sont généralement utilisés. Pour les peptides avec plus de 60 acides aminés dans la séquence, l'expression des gènes et le SDS-PAGE sont généralement utilisés pour les obtenir. Cependant, cette méthode prend beaucoup de temps et l'effet de séparation finale du produit n'est pas bon.
Défis et solutions pour une longue synthèse des peptides
Dans la synthèse de longs peptides, nous sommes toujours confrontés à un problème, c'est-à-dire que l'obstacle stérique de la réaction de condensation augmente avec l'augmentation de la séquence dans la synthèse, et le temps de réaction doit être ajusté pour rendre la réaction complète. Cependant, plus le temps de réaction est long, plus les effets secondaires sont produits et une partie du peptide cible se forme. Ces résidus - les chaînes peptidiques déficientes sont des impuretés clés produites dans une longue synthèse des peptides. Par conséquent, dans la synthèse du long peptide, le problème clé que nous devons surmonter est d'explorer les conditions de réaction et les méthodes de réaction de haute qualité, afin de rendre la réaction de condensation des acides aminés plus complète et pleine. De plus, réduisez le temps de réaction, car plus le temps de réaction est long, plus les réactions secondaires sont incontrôlables, plus les sous-produits sont complexes. Par conséquent, les trois points suivants sont résumés:
La synthèse des micro-ondes peut être utilisée: Pour certains acides aminés rencontrés dans le processus de synthèse qui ne sont pas faciles à intégrer, la synthèse micro-ondes peut être utilisée. Cette méthode a des résultats remarquables et réduit considérablement le temps de réaction et réduit la formation de deux sous-produits clés.
La méthode de synthèse des fragments peut être utilisée: Lorsque certains peptides sont difficiles à synthétiser par des méthodes de synthèse courantes et pas faciles à purifier, nous pouvons adopter toute la condensation de plusieurs acides aminés dans un certain segment du peptide à la chaîne peptidique dans son ensemble. Cette méthode peut également résoudre de nombreux problèmes dans la synthèse.
La synthèse de l'acylhydrazide peut être utilisée: La synthèse de l'acylhydrazide des peptides est une méthode de synthèse en phase solide du peptide Cys N-terminal et de la réaction sélective chimique hydrazide C-terminal entre la formation de liaisons amide pour atteindre la méthode de liaison peptidique. Sur la base de la position de Cys dans la chaîne peptidique, cette méthode divise toute la chaîne peptidique en plusieurs séquences et les synthétise respectivement. Enfin, le peptide cible est obtenu par réaction de condensation en phase liquide. Cette méthode réduit non seulement considérablement le temps de synthèse du peptide long, mais augmente également considérablement la pureté du produit final.
Purification des peptides longs
La particularité des longs peptides conduit inévitablement à des composants complexes des peptides bruts. Par conséquent, il est également difficile de purifier les longs peptides par HPLC. Série amyloïde de processus de purification des polypeptides, absorbant beaucoup d'expérience et utilisé avec succès dans la purification du long peptide. En adoptant de nouveaux équipements, le mélange de systèmes de purification multiples, de séparation répétée et d'autres méthodes d'expérience, le taux de réussite de la purification des peptides longs a été considérablement amélioré.
Heure du poste: 2025-07-03